| 闫娟,刘青杰,田梅,陆雪,蔡恬静,李爽,赵骅,田雪蕾,陈德清,高玲.中波紫外线照射后HaCaT细胞早衰和P53、P16表达研究[J].中华放射医学与防护杂志,2020,40(4):284-289 |
| 中波紫外线照射后HaCaT细胞早衰和P53、P16表达研究 |
| Premature senescence and the protein expressions of P53 and P16 in HaCaT cells after UVB exposure |
| 投稿时间：2019-10-16 |
| DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2020.04.007 |
| 中文关键词: 中波紫外线 早衰 角质形成细胞 P53 P16 |
| 英文关键词:Ultraviolet B Premature senescence Keratinocytes P53 P16 |
| 基金项目:北京市自然科学基金（7162137，7202139） |
| 作者 | 单位 | E-mail | | 闫娟 | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室, 北京 100088 | | | 刘青杰 | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室, 北京 100088 | | | 田梅 | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室, 北京 100088 | | | 陆雪 | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室, 北京 100088 | | | 蔡恬静 | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室, 北京 100088 | | | 李爽 | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室, 北京 100088 | | | 赵骅 | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室, 北京 100088 | | | 田雪蕾 | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室, 北京 100088 | | | 陈德清 | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室, 北京 100088 | | | 高玲 | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室, 北京 100088 | gaolingxinxin@126.com |
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| 中文摘要: |
| 目的 探索不同剂量中波紫外线（UVB）对人永生化角质形成细胞HaCaT早衰的影响及其可能的分子机制。方法 采用0、20、50、80和100 mJ/cm2UVB分别照射HaCaT细胞，于照射后72 h采用姬姆萨染色观察细胞形态，通过克隆形成实验检测细胞增殖能力，β-半乳糖苷酶染色检测早衰细胞比例，利用溶酶体红色荧光探针Lyso-Tracker Red检测照射后24、48、72 h细胞内溶酶体数量变化，划痕实验检测照射后24、48 h细胞迁移能力变化。采用蛋白质印迹法（Western blot）检测早衰相关蛋白P53和P16的表达变化。结果 20、50、80和100 mJ/cm2UVB照射后，HaCaT细胞出现早衰相关表型，照后72 h细胞体积增大（F=115.18，P<0.05），增殖能力降低（F=410.32，P<0.05），β-半乳糖苷酶活性增高（F=16.31，P<0.05），照后24、48、72 h溶酶体数量增多（F=17.65、38.36、13.66，P<0.05），照后24、48 h迁移能力降低（F=8.21、11.48，P<0.05）。照后72 h早衰相关蛋白 P53和P16表达增加。结论 UVB照射可诱导HaCaT细胞发生早衰，其机制可能通过引起HaCaT细胞P53和P16蛋白表达增加实现。 |
| 英文摘要: |
| Objective To explore the effects of ultraviolet B (UVB) on the premature senescence of human immortalized keratinocytes HaCaT cells and the possible underlying molecular mechanism. Methods HaCaT cells were exposed with UVB of different doses (20, 50, 80 and 100 mJ/cm2). At 72 h after exposure, cellular morphology was observed by Giemsa staining, cell proliferation was detected by clone formation assay, and the proportion of premature senescence cells was detected by β-galactosidase staining. The number change of lysosomes was detected by Lyso-Tracker Red fluorescence probe at 24, 48 and 72 h after exposure. Cell migration was measured by scratch test at 24 h and 48 h after exposure. The protein expressions of p53 and p16 related to premature senescence were detected by Western blot assay at 72 h after exposure. Results After UVB exposure, HaCaT cells showed a premature senescence phenotype. At 72 h after exposure, the cell volume increased (F=115.18,P<0.05), the cell proliferation ability decreased (F=410.32, P<0.05), the activity of β-galactosidase increased (F=16.31,P<0.05), and the expressions of P53 and P16 increased. In addition, the number of lysosomes increased at 24, 48, and 72 h after exposure (F=17.65, 38.36, 13.66, P<0.05),and cell migration capacity was inhibited at 24 and 48 h after exposure (F=8.21, 11.48, P<0.05). Conclusions UVB exposure can induce premature senescence of HaCaT cells by increasing the expression of p53 and p16 proteins. |
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