郭艳婷,王彦,杜利清,徐畅,曹嘉,刘建香,陈凤华,付岳,刘强*,苏旭.Tat-SmacN7对人乳腺癌细胞系的放射增敏作用[J].中华放射医学与防护杂志,2014,34(1):13-17
Tat-SmacN7对人乳腺癌细胞系的放射增敏作用
The radiosensitization effect of Tat-SmacN7 on breast cancer cell lines
投稿时间:2013-03-29  
DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2014.01.004
中文关键词:  Tat-SmacN7  乳腺癌  放射增敏  细胞凋亡  凋亡抑制蛋白
英文关键词:Tat-SmacN7  Breast cancer  Radiosensitization  Cell apoptosis  Inhibitor of apoptosis proteins
基金项目:国家自然科学基金(31240052);天津市自然科学基金(13JCYBJC23500,13JCQNJC11600);卫生行业科研专项(201002009)
作者单位E-mail
郭艳婷 300192 天津, 中国医学科学院放射医学研究所 天津市分子核医学重点实验室  
王彦 300192 天津, 中国医学科学院放射医学研究所 天津市分子核医学重点实验室  
杜利清 300192 天津, 中国医学科学院放射医学研究所 天津市分子核医学重点实验室  
徐畅 300192 天津, 中国医学科学院放射医学研究所 天津市分子核医学重点实验室  
曹嘉 300192 天津, 中国医学科学院放射医学研究所 天津市分子核医学重点实验室  
刘建香 中国CDC辐射防护与核安全医学所  
陈凤华 300192 天津, 中国医学科学院放射医学研究所 天津市分子核医学重点实验室  
付岳 300192 天津, 中国医学科学院放射医学研究所 天津市分子核医学重点实验室  
刘强* 300192 天津, 中国医学科学院放射医学研究所 天津市分子核医学重点实验室 liuqiang@irm-cams.ac.cn 
苏旭 中国CDC辐射防护与核安全医学所  
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中文摘要:
      目的 观察Tat-SmacN7对人乳腺癌SK-BR-3细胞放射敏感性的影响并探讨其机制。方法 取对数生长期乳腺癌SK-BR-3细胞,分为对照组、γ射线照射组、Tat-SmacN7组和Tat-SmacN7联合γ射线照射组(联合组)。MTT法检测Tat-SmacN7对SK-BR-3细胞的毒性;克隆形成实验检测Tat-SmacN7的存活分数;单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比(SER);流式细胞术检测Tat-SmacN7联合γ射线照射对细胞凋亡的影响;Western blot法检测细胞凋亡抑制蛋白XIAP和cIAP-1蛋白表达水平。结果 Tat-SmacN7随浓度升高对SK-BR-3细胞的增殖抑制率增大,药物浓度与细胞增殖率呈正相关(r=0.924,P<0.05),IC50为(62.62±1.19)μmol/L,IC20为(5.66±0.67)μmol/L;5 μmol/L Tat-SmacN7能增加SK-BR-3细胞的放射敏感性,联合组与照射组放射增敏比为1.48;6 Gy γ射线照射后48 h,联合组凋亡率显著高于照射组(t=7.01,P<0.05);与对照组相比,Tat-SmacN7组XIAP表达水平降低,联合组XIAP和cIAP-1蛋白表达水平均降低。结论 Tat-SmacN7通过促进人乳腺癌细胞SK-BR-3细胞的凋亡,增加其辐射敏感性,这一特性与XIAP的表达有关。
英文摘要:
      Objective To investigate the radiosensitive effect of Tat-SmacN7 on human breast cancer cell line of SK-BR-3 and the underlying mechanism. Methods SK-BR-3 cells in the logarithmic phase were divided into 4 groups: control group, drug group, 137Cs γ-ray radiation group and the case group (γ-ray radiation+Tat-SmacN7). MTT assay was performed to evaluate the cytotoxicity of Tat-SmacN7. Colony formation assay was used to measure cell survival fraction. A single-hit multi-target model was used to fit the survival curve and calculate the sensitive enhancement ratio (SER). Apoptosis rate was analyzed by using flow cytometry. The expressions of inhibitor of apoptosis proteins(IAP) including XIAP, cIAP-1 proteins were detected by Western blot method. Results Tat-SmacN7 inhibited cell growth in a dose-dependent manner(r=0.924,P<0.05)and its 50% inhibition concentration(IC50)was(62.62±1.19)μmol/L,and IC20 was(5.66±0.67)μmol/L. In addition, 5 μmol/L Tat-SmacN7 could enhance cell radiosensitivity with a SER of 1.48. After 6 Gy γ-ray radiation at 48 h, the incidence of apoptosis in the case group was higher than that in the irradiation alone group (t=7.01,P<0.05). Tat-SmacN7 only inhibited XIAP expression, whereas Tat-SmacN7 combined with radiation inhibited cIAP-1 as well. Conclusions Tat-SmacN7 has a radiosensitization effect on human breast cancer SK-BR-3 cell by promoting apoptosis, which might be related with XIAP expression.
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