苟巧,王春燕,张翠兰,佟鹏,苏旭.α粒子诱发BEP2D细胞恶性转化中脂质和DNA氧化损伤的研究[J].中华放射医学与防护杂志,2012,32(2):157-161
α粒子诱发BEP2D细胞恶性转化中脂质和DNA氧化损伤的研究
Study on oxidative lipid and DNA damages in the malignant transformed BEP2D cells induced by α-particle exposure
投稿时间:2011-08-03  
DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2012.02.013
中文关键词:  人支气管上皮细胞|α粒子|活性氧|氧化损伤|癌变
英文关键词:Human bronchial epithelial cell line|α-particle|Reactive oxygen radicals|Oxidative damages|Carcinogenesis
基金项目:国家自然科学基金(81000862);中国科学技术部社会公益研究专项(2005DIB1J087);卫生行业科研专项(200802018)
作者单位E-mail
苟巧 100088 北京,中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室  
王春燕 100088 北京,中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室  
张翠兰 100088 北京,中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室  
佟鹏 100088 北京,中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室  
苏旭 100088 北京,中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室 suxu@nirp.cn 
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中文摘要:
      目的 探讨α粒子诱发永生化人支气管上皮细胞BEP2D恶性转化的机制。 方法 运用DCFH-DA荧光探针标记活性氧(ROS),观察分析BEP2D细胞、α粒子作用BEP2D后第22代细胞RH22,以及α粒子作用BEP2D后恶性转化细胞株BERP35T-1内基础活性氧水平。丙二醛(MDA)测定试剂盒检测BEP2D、RH22和BERP35T-1细胞内脂质过氧化产物丙二醛的含量。采用免疫细胞化学法和免疫荧光染色法,检测BEP2D、α粒子作用BEP2D后第23代细胞RH23及BERP35T-1细胞内DNA氧化损伤产物8-OH-dG和DNA双链断裂产物γ-H2AX的表达水平。 结果 与BEP2D细胞相比,RH22和BERP35T-1细胞中基础活性氧水平显著升高(t=4.30和3.94,P<0.05),丙二醛的含量显著升高(t=4.89和15.10,P<0.05);RH23和BERP35T-1细胞中8-OH-dG表达上调(t= 3.80和2.92,P<0.05),γ-H2AX表达上调(t=7.61和12.67,P<0.05)。结论 氧化还原环境紊乱形成氧化压力,导致细胞内脂质和DNA氧化损伤增强,由此促进基因组不稳定性,可能是α粒子诱发BEP2D细胞恶性转化的机制之一。
英文摘要:
      Objective To investigate the mechanism of malignant transformation in human bronchial epithelial cell line BEP2D exposed to α-particles. Methods The levels of intracellular ROS and malonaldehyde (MDA) in BEP2D, RH22 (passage 22 of α-particle-irradiated BEP2D cells) and BERP35T-1 cells (derived from nude mice bearing malignant transformed cells generated from the passage 35 of α-particle-irradiated BEP2D cells) were assayed with DCFH-DA and MDA kit, respectively. The expressions of 8-OH-dG and γ-H2AX in BEP2D, RH23 (passage 23 of α-particle-irradiated BEP2D cells) and BERP35T-1 cells were also measured with immunocytochemistry and immunofluorescence staining. Results Compared to BEP2D cells, the levels of ROS (t=4.30 and 3.94, P<0.05) and MDA (t=4.89 and 15.10, P<0.05) increased in RH22 and BERP35T-1 cells. The expressions of 8-OH-dG (t= 3.80 and 2.92, P<0.05) and γ-H2AX (t= 7.61 and 12.67, P<0.05) in RH23 and BERP35T-1 cells were also higher than those in BEP2D cells. Conclusions Oxidative stress induces lipid peroxidation and DNA damage leading to genomic instability, which could contribute to cellular malignant transforming process in the human bronchial epithelial cell line BEP2D with α-particle exposure.
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