中华放射医学与防护杂志

马淑梅,吴丽珉,刘扬,等.P53在电离辐射诱导的细胞周期解耦联中的作用[J].中华放射医学与防护杂志,2008,28(6):597-600.MA Shu-mei,WU Li-min,LIU Yang,et al.Roles of p53 in ionizing radiation-induced cell cycle uncoupling[J].Chin J Radiol Med Prot,2008,28(6):597-600

P53在电离辐射诱导的细胞周期解耦联中的作用

Roles of p53 in ionizing radiation-induced cell cycle uncoupling

投稿时间：2007-11-15

DOI：

中文关键词: p53基因细胞周期解耦联 RNA干扰电离辐射

英文关键词:p53 gene Cell cycle uncoupling RNAi Ionizing radiation

基金项目:国家自然科学基金资助项目(30500142、30770649);吉林省科技发展计划资助项目(2005136);教育部留学回国人员科研启动资助项目(2005)

作者	单位	E-mail
马淑梅	130021 长春, 吉林大学公共卫生学院
吴丽珉	130021 长春, 吉林大学公共卫生学院
刘扬	130021 长春, 吉林大学公共卫生学院
施丹	130021 长春, 吉林大学公共卫生学院
易贺庆	130021 长春, 吉林大学公共卫生学院
张洁琼	130021 长春, 吉林大学公共卫生学院
汪海娇	130021 长春, 吉林大学公共卫生学院
刘晓冬	130021 长春, 吉林大学公共卫生学院	liuxd2002@yahoo.com

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中文摘要:

目的探讨p53基因在电离辐射(IR)诱导的MCF-7细胞周期解耦联中的作用。方法构建RNAi表达载体,经磷酸钙共沉淀法转染293T细胞形成病毒包装颗粒,感染MCF-7后采用Western blot检测P53蛋白的表达,建立p53基因沉默模型。将p53野生型(+ +)和沉默模型(- -)经电离辐射处理后,采用流式细胞术分别测定细胞周期并分析细胞多倍体的变化。结果与p53^{+ +}组比较,p53^{- -}模型组G₀ G₁期细胞百分数减少,S期、G₂期增加(P<0.01),倍体分析表明二倍体数减少,四倍体、八倍体均增加(P<0.01)。在p53^{+ +}和p53^{- -}细胞中,与假照射组比较,4 Gy照射后G₀ G₁期、S期细胞百分数减少,而G₂期增多(P<0.01);倍体分析表明,照射后二倍体数减少,四倍体、八倍体均增加(P<0.01)。与p53^{+ +}+IR组比较,p53^{- -}+IR 组发生G₀ G₁期、S期细胞百分数减少,G₂+M期增多(P<0.01),二倍体数减少,四倍体增多(P<0.01),八倍体无明显差别。结论电离辐射可以诱导细胞发生G₂期阻滞和细胞周期解耦联;P53在电离辐射诱导的MCF-7细胞G₂期阻滞中发挥作用,而在细胞周期解耦联中可能不发挥作用。

英文摘要:

Objective To explore the roles of p53 in ionizing radiation induced MCF-7 cell cycle uncoupling.Methods The p53 knock-down models was established in MCF-7 with retrovirus packaged particles from 293T cells through calcium acid phosphate co-precipitation, then Western blot was used to detect the protein expression. Flow cytometry(FCM) was used to analyze the cell cycle uncoupling and polyploid after irradiation.Results Compared with p53^{+ +} group, the percentages of G₀ G₁ cells in p53^{- -} group decreased, while those of S and G₂+M increased (P<0.01). In polyploidy analysis 2N cells decreased, whereas both 4N and 8N cells increased (P<0.01). Compared with sham-irradiation, 4 Gy X-ray led to the decrease of G₀ G₁, S cells, and the increase of G₂+M cells. The increase of 2N cells and decrease of 4N and 8N cells were observed in both p53^{+ +} and p53^{- -} cells. Compared with p53^{+ +}+IR group, the decrease of G₀ G₁ and S cells and the increase of G₂+M cells were significant (P<0.01) in p53^{- -}+IR groups. 2N cells decreased, 4N cells increased, but no changes in 8 N cells occurred. Conclusion Radiation might induce G₂ arrest and cycle uncoupling. p53 plays a role in the regulation of G₂ arrest, but no role in cycle uncoupling.

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