中华放射医学与防护杂志  2026, Vol. 46 Issue (4): 344-351   PDF    
引用本文
张娇, 王勇懿, 段敏, 杨喆, 黎文聪, 郝延辉, 左红艳, 李杨. 嗜酸性粒细胞缺失对急性放射性肺损伤的影响研究[J]. 中华放射医学与防护杂志, 2026, 46(4): 344-351, DOI: 10.3760/cma.j.cn112271-20250121-00029.
嗜酸性粒细胞缺失对急性放射性肺损伤的影响研究
张娇1,2 , 王勇懿2 , 段敏2 , 杨喆2 , 黎文聪2 , 郝延辉2 , 左红艳2 , 李杨1,2     
1. 河北大学生命科学学院, 保定 071002;
2. 军事科学院军事医学研究院, 北京 100850
收稿日期: 2025-01-21
通信作者: 李杨，Email: leeyoung109@hotmail.com
[摘要] 目的 探讨嗜酸性粒细胞(EOS)缺失对急性放射性肺损伤(RILI)进程的影响。方法 通过敲除GATA-1启动子中高亲和力GATA结合位点, 构建Δdbl.GATA基因编辑小鼠。将8~10周龄Δdbl.GATA雌性小鼠、Δdbl.GATA雄性小鼠、野生型(WT)C57BL/6J雌性和WT C57BL/6J雄性小鼠各29只分别按随机数表法分为对照组、照射后3d组和照射后7d组, 全身照射, 剂量为8.5 Gy。分别于照射后3和7 d统计小鼠肺指数, 采用流式细胞术检测小鼠肺组织EOS占白细胞比值、小动物肺功能检测系统检测小鼠肺功能、HE染色观察小鼠肺组织病理变化、放射免疫法检测小鼠肺组织TNF-α、IL-5、IL-4的含量。结果 照射后WT C57BL/6J雌性和雄性小鼠肺组织EOS占白细胞比值均低于对照组, 差异有统计学意义(t = 9.02~14.55, P < 0.001);Δdbl.GATA雌鼠肺组织EOS占白细胞比值显著低于WT C57BL/6J雌鼠(t = 4.66, P < 0.01)。照射后WT C57BL/6J雌性和雄性小鼠相对吸气峰值、相对呼气峰值、相对潮气量、相对每分通气量均显著低于照射前(t = 3.30~9.20, P < 0.05), Δdbl.GATA小鼠上述肺功能指标均高于WT C57BL/6J小鼠(t = -5.59~-2.61, P < 0.05)。照射后WT C57BL/6J小鼠肺组织TNF-α、IL-5、IL-4含量均高于对照组(t = -4.06~-2.68, P < 0.05), Δdbl.GATA雌鼠肺组织TNF-α、IL-5、IL-4的含量均低于WT C57BL/6J雌鼠(t = 2.12~3.23, P < 0.05)。两种小鼠肺脏指数、肺组织病理变化差异无统计学意义。结论 EOS缺失可减轻小鼠放射性肺损伤。
[关键词] 嗜酸性粒细胞    γ射线    放射性肺损伤    
Impacts of eosinophil deficiency on acute radiation-induced lung injury
Zhang Jiao1,2 , Wang Yongyi2 , Duan Min2 , Yang Zhe2 , Li Wencong2 , Hao Yanhui2 , Zuo Hongyan2 , Li Yang1,2     
1. College of Life Sciences, Hebei University, Baoding 071002, China;
2. Academy of Military Medical Sciences, Academy of Military Science, Beijing 100850, China
Corresponding author: Li Yang, Email: leeyoung109@hotmail.com
[Abstract] Objective To explore the impacts of eosinophil (EOS) deficiency on the progression of acute radiation-induced lung injury (RILI) Methods The Δdbl.GATA gene-edited mice were constructed by knocking out the high-affinity GATA binding site within the GATA-1 promoter region. The 8 to 10-week-old female and male Δdbl.GATA, as well as female and male wild-type (WT) C57BL/6J mice, 29 each type, were grouped into the control, 3 d post-irradiation, and 7 d post-irradiation groups using the random number table method. Mice in the latter two groups were exposed to total body irradiation at 8.5 Gy. At 3 d and 7 d post-irradiation, the lung indices of mice were calculated, the EOS-to-leukocyte ratios in the lung tissue of the mice were detected using flow cytometry, and the pulmonary function of the mice was evaluated using a small animal lung function testing system. Furthermore, the histopathological changes in the lung tissue were observed through hematoxylin and eosin (H&E) staining, and the TNF-α, IL-5, and IL-4 levels in the lung tissue were quantified by radioimmunoassay. Results Post-irradiation, compared to the mice in the control group, both female and male WT C57BL/6J gene-edited mice showed significantly lower EOS-to-leukocyte ratios of the lung tissue, with statistically significant differences (t =9.02-14.55, P < 0.001). Compared to the female WT C57BL/6J mice, the female Δdbl.GATA gene-edited mice exhibited significantly lower EOS-to-leukocyte ratios in the lung tissue (t =4.66, P < 0.01). Post-irradiation, both female and male WT C57BL/6J mice showed significantly lower relative peak inspiratory flow, relative peak expiratory flow, relative tidal volume, and relative minute ventilation volume than those before irradiation (t =3.30-9.20, P < 0.05). The above lung function parameters of the Δdbl.GATA gene-edited mice were significantly higher than those of the WT C57BL/6J mice (t = -5.59 to -2.61, P < 0.05). Additionally, the TNF-α, IL-5, and IL-4 levels of the lung tissue of the WT C57BL/6J mice were significantly higher than those of the control group (t = -4.06 to -2.68, P < 0.05), while these parameters in the lung tissue of the female Δdbl.GATA gene-edited mice were significantly lower than those in the female WT C57BL/6J mice (t =2.12-3.23, P < 0.05). No significant differences were observed in the lung index and histopathological changes of lung tissue between Δdbl.GATA gene-edited and WT C57BL/6J mice. Conclusion EOS deficiency can alleviate radiation-induced lung injury in mice.
[Key words] Eosinophil    γ-ray    Radiation-induced lung injury    

急性放射性肺损伤(radiation-induced lung injuries，RILI)主要发生于胸部肿瘤放射治疗、骨髓移植全身照射预处理以及各种核辐射突发事件，具有进行性肺组织破坏和肺功能恶化的特点，可导致呼吸衰竭和死亡[1]。目前，RILI机制仍未阐明，且缺乏安全有效的防治措施。研究表明T细胞[2-4]、巨噬细胞[4-5]、中性粒细胞[6-8]、肥大细胞[7-9]等免疫细胞在RILI进程中发挥重要作用。嗜酸性粒细胞(eosinophils，EOS)是先天性免疫细胞，参与防御反应以及局部和全身炎症过程[10]，EOS在急性放射性肺损伤中的作用鲜有揭示。本研究通过构建EOS缺失鼠，建立全身照射模型，探讨EOS缺失对于急性放射性肺损伤的影响。

材料与方法

1. 主要试剂与仪器：10%甲醛购自北京国药集团化学试剂有限公司；红细胞裂解液(R1010)、蛋白酶抑制剂和放射免疫沉淀法(RIPA)裂解缓冲液(R0020)均为北京索莱宝公司产品；一步法小鼠基因分型试剂盒(PD101-1)购自南京诺唯赞公司；GATA-1引物构自日本TaKaRa公司；死活染料(Zombie AquaTM Fixable Viability Kit，423101)、兔抗小鼠CD45 PE-Cy7(157206)、兔抗小鼠CD11b FITC(101206)、兔抗小鼠Ly6G Percp-Cy5.5(127615)、兔抗小鼠MHC-Ⅱ APC-Cy7(107627)、兔抗小鼠CD170 DAPI(155509)均为美国Biolegend公司产品；肝脏解离试剂盒(130-105-807)购自德国Miltenyi Biotec公司，DMEM(MA0215)购自大连MeilunBio公司，胎牛血清(FBS)(164210)购自武汉普诺赛公司；小鼠TNF-α放射免疫检测试剂盒、小鼠IL-4放射免疫检测试剂盒、小鼠IL-5放射免疫检测试剂盒均购自北京福瑞润泽生物技术有限公司；戊巴比妥购自美国Sigma公司。60Co源为军事医学研究院自建；小动物肺功能检测系统为法国EMKA公司产品；包埋机(EG1150)、切片机(RM2255)和数字切片扫描仪均购自德国Leica公司；水平摇床(TS-1)购自中国北京六一仪器厂；流式细胞仪为美国BD公司产品。

2. Δdbl.GATA基因编辑小鼠构建和鉴定：Δdbl.GATA基因编辑小鼠由赛业生物科技有限公司以C57BL/6J小鼠为背景构建。GATA-1启动子中高亲和力GATA结合位点的缺失，会导致EOS谱系的选择性缺失[11]，构建策略如图 1所示，通过敲除GATA-1启动子中高亲和力GATA结合位点，构建Δdbl.GATA基因编辑小鼠，即为EOS谱系缺失鼠。鉴定方法：剪鼠尾，先采用一步法小鼠基因分型试剂盒提取鼠尾DNA。再采用PCR技术扩增目的基因GATA-1，GATA-1引物如下：F：5′ TCTTATCCCAATCCTCTGGGACT 3′；R：5′ TATGTGTGGGTTGGACCTGTAT 3′；PCR实验条件为95℃ 5 min，95℃ 30 s、55℃ 30 s、72℃ 30 s重复40次，72℃ 7 min，4℃持续。最后鉴定扩增出的GATA-1基因是否为Δdbl.GATA小鼠的基因型。

图 1 Δdbl.GATA基因编辑小鼠构建策略图 Figure 1 Diagram showing the strategy for constructing Δdbl.GATA gene-edited mice

3. 实验动物与分组：购买自北京斯贝福生物技术有限公司的8周龄SPF级野生型C57BL/6J小鼠，动物许可证号：SCXK(京2024-0001)。小鼠在军事医学研究院动物中心(湿度40%，温度22±1℃)适应性饲养2周。本研究使用Δdbl.GATA雌性小鼠、Δdbl.GATA雄性小鼠、WT C57BL/6J雌性小鼠和WT C57BL/6J雄性小鼠各29只。肺指数统计、肺组织病理观察和放射免疫法检测采用同一批小鼠，每种小鼠15只，按随机数表法分为对照组、照射后3 d组、照射后7 d组，每组5只小鼠；肺功能实验采用自身对照，每种小鼠5只，分别于照射前、照射后3 d、照射后7 d进行肺功能检测，实验过程中WT C57BL/6J雌性小鼠死亡1只；流式细胞术分析EOS数量实验，每种小鼠9只，按随机数表法分为对照组、照射后3 d组、照射后7 d组，每组3只小鼠。每个实验都进行了3次独立重复实验。

4. 照射方法：将实验用小鼠全部装入专用照射盒中，照射组小鼠应用60Co γ射线进行全身单次照射，照射剂量为8.5 Gy，剂量率为69.71 cGy/min。将对照组的动物置于相同条件下，但不进行照射。

5. 流式细胞术分析肺组织EOS数量

(1) 肺组织单细胞解离：分别于照射后3和7 d，采用0.5%戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠进行麻醉、肺组织取材。利用肝脏解离试剂盒解离小鼠肺组织。主要步骤如下：将肺组织在消化液中剪碎后消化，消化液为含5% FBS、1%青-链霉素(PS)、1%羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)的杜尔贝科改良伊格尔培养基(DMEM)中加入50 μm酶D、25 μm酶R、5 μm酶A。消化后400×g离心5 min用磷酸盐缓冲液(PBS)重悬，经70 μm细胞筛过筛、400×g离心5 min后用红细胞裂解液重悬裂红，再离心后用适量PBS重悬，即可用于后续流式细胞术。

(2) 流式细胞检测：将单细胞悬液加入流式管中，依次加入死活染料Alexa Fluor 430、兔抗小鼠CD45 PE-Cy7、兔抗小鼠CD11b FITC、兔抗小鼠Ly6G Percp-Cy5.5、兔抗小鼠MHC-Ⅱ APC-Cy5.5、兔抗小鼠CD170 DAPI。4℃避光孵育30 min。经过两次离心(400×g、5 min)重悬后，细胞上机检测。CD45+细胞为白细胞，CD45+ CD11b+ Ly6G- MHC Ⅱ- CD170+细胞为EOS[12]，分别计算EOS/活细胞和EOS/白细胞(图 2)。

图 2 小鼠肺组织EOS圈门策略 Figure 2 EOS gating strategy for the lung tissue of mice

6. 肺功能检测：应用小动物肺功能检测系统分别于照射前、照射后3和7 d检测小鼠肺功能。每个时间点5只小鼠，检测参数为：吸气峰值、呼气峰值、潮气量、每分通气量，记录时间为3 min。

7. 取材：分别于照射后3和7 d，采用0.5%戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠进行麻醉。先进行下腔静脉取血，然后剖开胸腔取出肺脏，用生理盐水冲洗，经滤纸吸干水分后称重。将左肺固定于10%甲醛液中，用于后续病理观察；将右肺于液氮冻存(取材结束后保存于-80℃冰箱)，备做细胞因子TNF-α、IL-5、IL-4的检测。

8. 肺组织病理观察：每组按随机数表法选取3只小鼠的肺组织固定于10%多聚甲醛；1周后依次经70%乙醇20 min；80%乙醇20 min；90%乙醇20 min；95%乙醇Ⅰ 15 min；95%乙醇Ⅱ 15 min；100%乙醇Ⅰ 15 min；100%乙醇Ⅱ 15 min；二甲苯Ⅰ 6 min；二甲苯Ⅱ 6 min脱水及透明。将肺组织于60℃石蜡中浸泡1.5 h后进行包埋；包好的蜡块置于冰台上，冷却凝固1 h后取出切片(3 μm)；切片烘干后依次进行脱蜡、苏木素染色、盐酸乙醇分化、伊红染色、透明、封片；最后采用数字切片扫描仪对切片进行图像采集。

9. 放射免疫法检测细胞因子：从-80℃冰箱取出冻存的小鼠肺组织，称重后放入含有磁珠和组织裂解液(含1%蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液)的1.5 ml微量离心管(EP管)中。用组织匀浆仪将肺组织破碎匀浆5次(50 s/次，65 Hz)，每次中断10 s。肺组织匀浆结束后于冰上静置10 min。15 300×g 4℃离心10 min后取上清液。检测肺组织上清蛋白浓度后开始放射免疫检测。在非特异性绑定管、零标准管、标准管、样品管中分别加入200 μl缓冲液、100 μl缓冲液、100 μl标准品、100 μl提取的肺组织上清液。然后每个标准管和样品管再加入100 μl抗体，所有管中再加入100 μl细胞因子相应的放射性标记物混匀，于4℃冰箱孵育24 h。最后所有管均加入二抗分离剂混匀，5 800×g 4℃离心25 min弃上清，测各管沉淀放射性能量值。B为标准品，T为总放射性，B0为标准品在0点的放射性计数值。以B/T计算非特异性绑定管及零标准管结合百分率，以B/B0计算标准管及样品管结合百分率，绘制标准曲线，并算出样品值。

10. 统计学处理：采用SPSS 25.0软件进行数据分析，GraphPad Prism软件作图。实验数据经正态性检验符合正态分布，以x±s表示。小鼠肺组织EOS占总活细胞比值采用独立样本t检验进行比较。小鼠肺功能检测结果比较采用重复测量方差分析。小鼠EOS占白细胞比值、肺组织各细胞因子及肺指数的结果比较均采用双因素方差分析，采用Bonferroni检验进一步进行两两比较。P < 0.05为差异有统计学意义。

结果

1. Δdbl.GATA小鼠基因型鉴定结果：纯合型小鼠基因序列为：GACAGCCTGTTACTGCGGCACCAACAGCCACAGTCGAGTCCGCCCCAGAGCAGGCCAGAGCTGGCGTAAGCCCCAGGCAC；杂合型小鼠基因序列为：GACAGCCTGTTACTGCGGCACCAACAGCCACAGTCGAGTCCGCCCCAGAGCAGGCCAGAGCTGGCGTAAGCCCCAGGCAC、ACAGCCTGTTACTGCGGCACCAACAGCCACAGTCGAGTCCATCTGATAAGACTTATCTGCTGCCCCAGAGCAGGCCAGA；野生型小鼠基因序列为：ACAGCCTGTTACTGCGGCACCAACAGCCACAGTCGAGTCCATCTGATAAGACTTATCTGCTGCCCCAGAGCAGGCCAGA。根据基因型鉴定结果，选择纯合Δdbl.GATA小鼠进行后续实验。

2. 8.5 Gy 60Co-γ射线照射对小鼠肺组织EOS数量的影响：Δdbl.GATA雌性小鼠、Δdbl.GATA雄性小鼠、WT C57BL/6J雌性小鼠和WT C57BL/6J雄性小鼠的肺组织EOS占总活细胞比值分别为0.12±0.02、0.33±0.02、3.44±0.90和0.33±0.02。Δdbl.GATA雌性和雄性小鼠肺组织EOS占总活细胞比值均显著低于WT C57BL/6J雌性和雄性小鼠(t=6.37、39.76，P < 0.001)，表明EOS缺失鼠构建成功。照射后3和7 d，WT C57BL/6J雌性和雄性小鼠肺组织EOS占白细胞比值均显著低于对照组(t=11.25、14.55、9.02、9.64，P < 0.001)；Δdbl.GATA雌性和雄性小鼠肺组织EOS占白细胞比值较对照组差异无统计学意义(P>0.05，表 1)。照射后，Δdbl.GATA雌鼠肺组织EOS占白细胞比值显著低于WT C57BL/6J雌鼠(t=4.66，P < 0.01)；Δdbl.GATA雄鼠肺组织EOS占白细胞比值较WT C57BL/6J雄鼠差异无统计学意义(P>0.05，表 1)。

表 1 8.5 Gy 60Co-γ射线照射对小鼠肺组织EOS/白细胞比值的影响(%，x±s) Table 1 Effects of 8.5 Gy 60Co γ-ray irradiation on the EOS-to-leukocyte ratio of the lung tissue of mice (%, x±s)

3. 受照8.5 Gy后Δdbl.GATA和WT C57BL/6J小鼠肺指数变化：照射后3和7 d，Δdbl.GATA小鼠与WT C57BL/6J小鼠肺脏指数较对照组差异均无统计学意义(P>0.05，表 2)。两种小鼠肺脏指数于照射后各时间点差异均无统计学意义(P>0.05，表 2)。

表 2 8.5 Gy 60Co-γ射线照射对小鼠肺指数的影响(x±s) Table 2 Effects of 8.5 Gy 60Co-γ ray-irradiation on the lung index of mice (x±s)

4. 受照8.5 Gy后Δdbl.GATA和WT C57BL/6J小鼠肺功能变化

(1) WT C57BL/6J小鼠：照射后3和7 d，WT C57BL/6J雌性和雄性小鼠相对吸气峰值、相对呼气峰值、相对潮气量、相对每分通气量均显著低于照射前(t=5.75、4.95、5.19、4.19、5.30、6.13、5.21、9.20、5.11、3.30、3.60、5.04、5.15、8.49、5.62，P < 0.05，表 3)。

表 3 8.5 Gy 60Co-γ射线照射后Δdbl.GATA和WT C57BL/6J小鼠肺功能的变化(%，x±s) Table 3 Changes in the pulmonary function of Δdbl.GATA gene-edited and WT C57BL/6J mice exposed to 8.5 Gy 60Co γ-ray irradiation (%, x±s)

(2)Δdbl.GATA小鼠：照射后3 d，Δdbl.GATA雌鼠的相对吸气峰值、相对每分通气量均显著低于照射前(t=5.17、4.93，P < 0.01)，雄鼠的相对吸气峰值、相对每分通气量显著低于照射前(t=5.22、3.87，P < 0.05，表 3)。

(3) 两种小鼠比较：Δdbl.GATA小鼠的相对吸气峰值、相对呼气峰值、相对潮气量、相对每分通气量均高于WT C57BL/6J小鼠，差异有统计学意义(t=-4.22、-5.59、-4.54、-5.22、-5.26、-2.61、-4.19、-4.93、-3.04、-2.64、-3.42、-3.42、-3.42、-3.66，P＜0.05)，提示EOS缺失小鼠于照射后肺功能损伤较野生鼠减轻(表 3)。

5. 受照8.5 Gy后Δdbl.GATA和WT C57BL/6J小鼠肺组织病理学变化：照射后3和7 d，Δdbl.GATA和WT C57BL/6J小鼠肺组织主要病变为细支气管上皮细胞变性、脱落，偶见肺间质少量炎细胞浸润。两种小鼠肺组织病变未见显著差异，雌性和雄性小鼠肺组织病变未见显著差异(图 3)。

图 3 8.5 Gy 60Co-γ射线照射后Δdbl.GATA和WT C57BL/6J小鼠肺组织病理变化  ×20 Figure 3 Histopathological changes in the lung tissue of Δdbl.GATA gene-edited and WT C57BL/6J mice exposed to 8.5 Gy 60Co-γ-ray irradiation  ×20

6. 受照8.5 Gy后Δdbl.GATA和WT C57BL/6J小鼠肺组织TNF-α、IL-5、IL-4含量变化

(1) WT C57BL/6J小鼠：照射后3 d，雌鼠肺组织TNF-α、IL-5、IL-4含量较对照组均显著升高(t=-2.91、-4.06、-3.00，P < 0.05)。照射后7 d，雌鼠肺组织IL-5含量较对照组均显著升高(t=-2.68，P < 0.05，表 4)。

表 4 8.5 Gy 60Co-γ射线照射对Δdbl.GATA和WT C57BL/6J小鼠肺组织TNF-α、IL-5、IL-4含量的影响(x±s) Table 4 Effects of 8.5 Gy 60Co γ-ray irradiation on TNF-α, IL-5, and IL-4 levels of the lung tissue of Δdbl.GATA gene-edited and WT C57BL/6J mice (x±s)

(2)Δdbl.GATA小鼠：照射后7 d，雌鼠肺组织IL-5含量较对照组显著升高义(t=-2.77，P < 0.05)；其余指标与对照组差异均无统计学意义(P>0.05，表 4)。雄鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05，表 4)。

(3) 两种小鼠比较：Δdbl.GATA雌鼠肺组织TNF-α、IL-5、IL-4的含量均显著低于WT C57BL/6J雌鼠, 差异有统计学意义(t=2.72、3.23、2.12，P < 0.05)。雄鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05，表 4)。

讨论

EOS在非感染性炎症相关疾病中发挥重要作用。EOS是引起哮喘气道炎症最为关键的效应细胞之一。在机体暴露于过敏原后，肺部募集的EOS因受局部微环境影响，抗凋亡能力增强、生存周期延长，导致EOS消退延迟，活化的EOS在肺部过度聚集，EOS释放大量颗粒蛋白及炎症介质，损伤周围细胞，加重哮喘炎症状态并参与炎症维持[13-14]。大量研究显示，靶向诱导EOS死亡将有利于哮喘炎症的控制，如凋亡抑制蛋白Bcl-2抑制剂[15]、铁死亡诱导剂[16]、髓系shp2敲除[17]等。然而，有研究报道存活的急性呼吸窘迫综合征患者肺部EOS数量高于死亡的急性呼吸窘迫综合征患者，提示EOS在急性呼吸窘迫综合征的发生中具有保护作用[18]。上述研究表明，EOS在肺部不同疾病模型的非感染性炎症中发挥促炎或抑炎作用。电离辐射诱发细胞DNA损伤及多种形式细胞死亡，产生损伤相关分子模式，导致机体多组织非感染性炎症，本研究重点关注放射性肺炎，EOS在放射性肺炎发生发展中的作用尚未阐明。

EOS胞浆颗粒含有4种高度碱性蛋白，即主要碱性蛋白(major basic protein，MBP)、EOS阳离子蛋白(eosinophil cationic protein，ECP)、EOS过氧化物酶(eosinophil peroxidase，EPO)和EOS源性神经毒素(eosinophil-derived neurotoxin，EDN)，它们能够诱导组织损伤和功能障碍[10]。EOS还可以合成、储存和分泌多种其他颗粒内容物，如细胞因子(如IL-4、IL-5、IL-6、IL-13、TNF-α等)、趋化因子、生长因子等，具有多种生物学作用[10]。IL-4、IL-5和IL-13均为Th2型细胞因子。IL-4和IL-13可以诱导B淋巴细胞的IgE类转换，并在T细胞和EOS迁移到过敏性炎症组织中发挥作用。IL-5能够促进EOS生成、存活和募集。目前，有五种被批准的生物制剂通过控制IgE、IL-5及其受体和IL-4受体α抑制Th2型炎症[19]。TNF-α是一种多效性促炎细胞因子，过量产生可诱导急性和慢性炎症反应如哮喘、类风湿性关节炎、克罗恩病和银屑病等[20]。

本研究发现，8.5 Gy 60Co-γ射线全身照射导致野生型小鼠肺功能吸气峰值、呼气峰值、潮气量、每分通气量等多个指标显著降低，肺组织间质性炎症，伴TNF-α、IL-5、IL-4等细胞因子含量显著升高，表明8.5 Gy 60Co-γ射线全身照射可致急性放射性肺损伤。EOS缺失小鼠肺功能损伤显著轻于野生鼠，TNF-α、IL-5、IL-4含量也显著少于野生小鼠，表明EOS缺失可减轻放射性肺损伤。但肺组织病理学变化EOS缺失小鼠较野生鼠尚未发现显著减轻，相比于病理变化观察，肺功能检测是一种更敏感的检测方法，能够更灵敏、客观地反映肺损伤情况，且肺功能的变化可能早于组织病理学改变；此外，本研究野生小鼠肺组织病理改变以间质性炎症变化为主，且程度较轻，HE染色病理观察较难以形成确切结论，将在后续研究中通过特殊染色或免疫组织化学染色等进一步予以探讨，并将深入研究EOS缺失减轻放射性肺损伤的机制。

利益冲突  无

作者贡献声明  张娇负责实验设计、实验操作、数据统计分析、作图、文章撰写；王勇懿、段敏、杨喆、黎文聪协助实验操作；郝延辉、左红艳指导部分实验；李杨负责指导实验设计和论文修改

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