18true 目的 探讨全身不同剂量照射对皮肤软组织创伤愈合的剂量效应关系。方法 用⁶⁰Coγ射线一次性均匀照射1～8Gy,照后1h内,用特制的圆孔刀致大鼠背部全层皮肤22mm创面2个(占体表面积的25%).结果 创伤合并0、1、2、3、4、5、6、7、8Gy全身照射后,随照射剂量增加,创伤愈合速度明显减缓,残留面积明显增大,如伤后7d,单创组有33.5%的创面未愈合,复合伤组分35.4%,38.1%,41.6%,48.8%,53.9%,63.7%,69.2%,73.9%的创面未愈合。统计学显示,伤后不同剂量与未愈合创面%(Ý)间有明显的剂量效应关系。据此推导出9个剂量效应公式。这些结果主要为群体判估放创复合伤伤情发展提供了重要基础数据。结论 放创复合伤时创伤愈合延迟有明显的剂量效应关系。]]> 17true 目的 研究合并全身放射损伤时创伤局部成纤维细胞数量减少与细胞增殖的关系。方法 采用组织学和免疫组化方法检测大鼠皮肤伤口局部成纤维细胞数量变化及与细胞增殖密切相关的增殖性细胞核抗原(PCNA)、细胞周期素E(CyclinE)及细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)含量变化。结果 合并全身放射损伤时皮肤伤口局部成纤维细胞数量在伤后5、7和10d显着少于单纯创伤组,并显着延迟高峰期；伤口局部PCNA和CDK4含量在伤后3、5和7d显着低于单纯创伤组,伤口局部CyclinE含量在伤后3、5、7和10d也显着低于单纯创伤组。结论 全身放射损伤可抑制伤后早期细胞周期G1期到S期的转变,抑制细胞增殖,从而使伤口局部成纤维细胞数量减少,这可能是合并全身放射损伤时创伤难愈的重要原因。]]> 16true 目的 研究合并全身放射损伤的创伤(放创复合伤)局部成纤维细胞凋亡变化及其机理。方法 采用组织学、免疫组化、透射电镜、原位凋亡检测等方法观察大鼠皮肤伤口局部成纤维细胞数量、凋亡变化及凋亡调控分子Bcl-2和Bax含量变化。结果 放创复合伤皮肤伤口成纤维细胞凋亡较单纯创伤组显着增加,伤口局部Bax含量也显着增加,Bcl-2含量和Bcl-2Bax比值较单纯创伤组显着降低。结论 全身放射损伤可使创伤局部成纤维细胞凋亡增加,从而使伤口局部成纤维细胞数量减少；伤口局部Bcl-2、Bax含量及其比值异常可能是成纤维细胞凋亡增加的重要原因。]]> 15true 1.碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在创伤愈合过程中具有重要作用^[2,3],但合并全身放射损伤的创伤局部其含量变化及其意义仍未见报道,因此本实验拟对此进行研究,以期深入阐明放创复合伤创伤难愈的理论机理,并为进一步制订促愈措施提供实验依据。]]> 14true 目的 研究神经生长因子对放创复合伤是否同时具有促进创面愈合和造血恢复的作用。方法 全身结合局部给药后,观察动物存活、局部创面愈合速度、修复细胞成分和血细胞的变化。结果 用药后,复合伤动物的存活率提高,外周血白细胞和骨髓有核细胞数明显增加；创面愈合速度加快,局部成纤维细胞和血管内皮细胞数量明显增加。结论 神经生长因子对放射复合伤难愈创面具有良好的促愈效果,同时还表现出一定的抗放作用。]]> 13true 60Coγ射线一次性照射后,伤口局部炎症细胞明显减少,中性粒细胞凋亡增加,巨噬细胞膜受体和TGFβ、PDGF等细胞因子分泌减少,成纤维细胞增殖受抑制,愈合过程显着延迟13,提示大剂量电离辐射后,在修复过程的早期启动阶段即发生了障碍,但对于伤后这种修复启动延迟的分子机理尚缺乏深入研究。NFκB是调节多种即早基因的转录因子,对多种炎症因子如TNFα、IL-1、IL-6等起重要调控作用,同时还调节与细胞增殖、运动和凋亡相关的多种基因。]]> 12true 目的 探讨骨髓间充质干细胞对放创复合伤创面的促愈作用。方法 利用自体骨髓来源的间充质干细胞移植于局部合并放射损伤的创面,采用荧光示踪技术、形态学观察、胶原染色、成纤维细胞和毛细血管计数、羟脯氨酸含量测定等多种指标,观察了间充质干细胞对放创复合伤创面的促愈作用。结果 间充质干细胞能加快创面愈合,促进肉芽组织生长和胶原合成。结论 骨髓间充质干细胞对放创复合伤创面有明显的促愈效应。]]> 11true 1.如同多能造血干细胞的存在赋予骨髓组织强大的造血功能以维持血液系统的新陈代谢一样,多潜能的MSC存在为骨、软骨、肌肉等间充质组织的损伤修复提供了潜在的结构和功能修复的源泉。]]> 10true 目的 探讨5Gy全身照射对伤口成纤维细胞(fibroblasts,FBs)功能的抑制效应及W₁₁a₁₂的促愈作用。方法 采用60Coγ射线5Gy全身照射大鼠复合背部植入聚乙烯醇海绵的皮肤伤口模型,观察伤后伤口FBs的纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子β₁(TGFβ₁)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)免疫细胞化学染色反应的变化及W₁₁a₁₂对其的影响。结果 5Gy全身照射复合皮肤创伤后第3、5天伤口内FN、TGFβ₁、bFGF免疫细胞化学染色反应阳性的FBs数量均显着减少,但减少的程度有所不同,由重到轻依次为bFGF、FN、TGFβ₁.而W₁₁a₁₂能显着增加未照射组和照射组伤口中FN、TGFβ₁、bFGF免疫细胞化学染色反应阳性的FBs数量。结论 全身放射损伤对伤口中FBs的合成与分泌功能具有抑制作用,增强FBs合成和分泌功能是W₁₁a₁₂促愈作用的一个途径。]]> 9true 8true 目的 探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)对原代脐静脉内皮细胞放射损伤的保护作用。方法 采用HE染色及MTT法观察6Gy和12Gy辐射对内皮细胞形态及增殖活性的影响,同时观察VEGF对内皮细胞放射损伤的保护作用。结果 放射损伤组在细胞大小和形态方面发生明显改变,6Gy能引起内皮细胞增殖活性增强,而12Gy则导致活性下降；VEGF明显促进内皮细胞增殖,并能改善12Gy所引起的损伤。结论 VEGF可作为放射损伤的拮抗剂,在创面修复中具有很好的应用前景。]]> 7true 目的 研究软X射线局部照射后大鼠伤口组织细胞周期的时相变化。方法 PI染色,流式细胞术(FCM)检测细胞周期；BrdU掺入后采用SABC染色检测细胞增殖。结果 在伤后3～9d,对照侧G₀G₁期细胞逐渐减少,S期细胞增加,9d时达到峰值；G₂M期细胞增加,15d时达到峰值。照射侧G₀G₁期细胞增加,S期和G₂M期细胞减少。在伤后12～22d,照射侧S期细胞逐渐增加,22d时达到峰值,大量的细胞停留在S期。在整个愈合过程中,G₂M期细胞百分数均低于对照侧。BrdU掺入SABC染色阳性细胞主要为成纤维母细胞、血管内皮细胞以及平滑肌细胞。结论 521Gy软X射线局部照射后,细胞发生G₁期阻滞和S期延长,G₂M转换障碍,细胞分裂增殖受抑,创伤愈合延迟与细胞周期的紊乱有关,G₁期阻滞和S期延长越严重,愈合延长时间越长。]]> 6true 目的 研究软X射线局部照射对创伤愈合的影响规律。方法 采用大体观察、组织病理学、免疫组化(胶原染色)和图像分析等方法,动态观察不同剂量软X线局部照射后大鼠伤口愈合的过程。结果 0.50、1.01、1.96、3.26、4.00、5.21Gy组照射侧的创面愈合时间比对照侧分别延长了1.6、4.2、5.4、6.6、8.2、9.4d,70及10.0Gy组则创面不愈(>40d).各组的已愈创面百分率在3～9d之间的变化幅度均比对照侧小,随着照射剂量的增大,变化的幅度亦减小,表明创面愈合速度减慢。照射后伤口组织胶原的合成降低,排列紊乱,肉芽组织的结构不规则。结论 局部软X线照射后,大鼠伤口愈合延迟,在0.50～5.21Gy之间延迟时间随照射剂量的增大而延长。]]> 5true 4true 目的 阐明机体免疫功能的放烧复合效应,为放烧复合伤免疫功能障碍的调控提供依据。方法 于不同时相点测定放烧复合伤小鼠(5Gyγ射线照射合并12%Ⅱ度烧伤)的脾体比,脾脏组织学观察,分离脾脏T细胞,RTPCR检测其IFNγ和IL-4的基因表达水平。结果 ①伤后放烧组的脾脏指数和组织结构的恢复明显快于单放组；②放射损伤后T细胞IFNγ和IL4的基因表达均受到抑制,但与IL-4比较,IFNγ表达量的降幅小、恢复快；③放射损伤后脾脏指数和T细胞IL-4的基因表达呈双向变化；④放烧组IFNγ表达量明显高于单放组,而两伤组IL-4表达量无区别。结论 ①放射损伤是放烧复合伤的主导损伤因素；②IL-4的辐射敏感性高于IFNγ；③烧伤因素能促进放烧复合伤后脾脏淋巴细胞的增殖及IFNγ的表达,不能促进IL4的表达；④受照机体内仍然存在着促进IL4表达恢复的有效机理。]]> 3true 目的 探讨放烧复合伤小鼠腹腔巨噬细胞数量、形态及其IL-12基因表达变化的复合效应。方法 于单纯放射损伤(5Gy)或放烧复合伤(5Gy合并12%Ⅱ度烧伤)后不同时相点分离、计数小鼠腹腔巨噬细胞,观察其形态学变化,RT-PCR方法检测其IL-12、p35和p40的基因表达水平。结果 ①同放射损伤组相比,放烧复合伤组早期巨噬细胞数量减少速度更快,减少程度更大,但后期恢复速度明显加快；②同放射损伤组相比,放烧复合伤组伤后早期溶解坏死的巨噬细胞较多,但在形态上更接近正常；③两伤组p35和p40伤后表达的变化趋势一致,但放烧复合伤组伤后各时相点两基因的表达量明显高于放射损伤组。结论 放烧复合伤在免疫细胞数量、形态和功能上具有“早期加重,后期减轻”的复合效应特点,提示“早期救治”在放烧复合伤救治中的重要性。]]> 2true 1true