8true 目的 研究电离辐射对小鼠胸腺细胞及脾细胞中p16、CyclinD1及CDK4蛋白表达的影响。方法 采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果 时效实验证实,2.0GyX射线全身照射后8,24及48h,胸腺细胞p16蛋白表达显著增高(分别P<0.05、P<0.01及P<0.05);照射后24h,脾细胞p16蛋白表达显著增高(P<0.05)。然而,照射后8～24h,胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低(P<0.05～P<0.01);照射后8～72h,脾细胞CDK4蛋白表达显著降低(P<0.05～P<0.01)。量效实验证实,1.0,2.0及4.0Gy全身照射后24h,胸腺细胞及脾细胞p16蛋白表达均显著增高(P<0.05～P<0.01)。然而,2.0Gy照射后胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低(P<0.05);0.5～6.0Gy照射后脾细胞CDK4蛋白表达显著降低(P<0.05～P<0.01)。研究还发现,胸腺细胞及脾细胞中CyclinD1蛋白表达于照射后均明显降低。结论 电离辐射可诱导胸腺细胞及脾细胞中p16蛋白表达增高。p16-CyclinD1/CDK4通路可能在X射线诱导胸腺细胞G₁期阻滞中起重要作用。]]> 7true 目的 检测低剂量辐射(LDR)对小鼠腹腔巨噬细胞IL-12的影响,同时观察胸腺细胞CD2及腹腔巨噬细胞表面分子CD48的变化并分析其与IL-12变化的关系。方法 分别采用Northernblot和ELISA检测了0.075GyX射线全身照射后IL-12转录水平、蛋白水平的变化;采用荧光免疫流式细胞术检测CD2、CD48蛋白表达的变化。结果 (1)IL-12的改变:0.075GyX射线全身照射后1h巨噬细胞中IL-12、p35及p40亚基mRNA水平均迅速升高,分别达到假照组的131%和192%(P<0.05),而后开始回降直至照后16～48h恢复正常;巨噬细胞分泌IL-12在照后4～8h明显增高(P<0.05)。(2)CD2、CD48表达变化:0.075GyX射线照射后4h胸腺细胞CD2表达即开始升高,至8h达峰值(P<0.05～0.01);巨噬细胞CD48表达在照射后2h开始升高,至48h仍明显高于假照水平(P<0.05～0.01);4h量效结果显示,50,75,100和200mGy均使CD2、CD48表达上调(P<0.05)。结论 LDR可引起IL-12表达上调,CD2、CD48分子与IL-12的变化具有一致性,提示两者可能参与IL-12的免疫调控。]]> 6true 目的 研究低剂量X射线照射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的适应性反应。方法 昆明雄性小鼠接受诱导剂量(D1,75mGy)和攻击剂量(D2,1.0,2.0和3.0Gy)全身照射。通过不连续泛影葡胺密度梯度离心法分离小鼠睾丸组织不同种类生精细胞,流式细胞术(FCM)检测各类生精细胞凋亡。结果 当D2照射前6h给予D1预照射时明显减轻D2对睾丸精原细胞和精母细胞凋亡的损伤作用,而对精子细胞和精子影响不明显。当D1和D2间隔3,6,12和24h,发现D2剂量较小(1.0和2.0Gy)时,精原细胞和精母细胞的凋亡百分率减少出现较早、较明显,而且持续时间较长;反之,D2剂量较大(3.0Gy)时,精原细胞和精母细胞凋亡百分率变化不明显。结论 低剂量X射线照射可以选择性诱导小鼠睾丸精原细胞和精母细胞凋亡的适应性反应,并与D1和D2间隔时间及D2剂量有关。]]> 5true 目的 研究低剂量电离辐射对转录因子NF-κBDNA结合活性的影响,探讨NF-κB结合活性信号传导通路的机理。方法 采用凝胶电泳移动变化分析及免疫组织化学的方法检测了X射线照射后EL4细胞NF-κBDNA结合活性的时程变化及p65核转位、IκBα水平的变化,同时用脂质体介导的瞬时转染法将空质粒和NF-κB荧光素酶表达质粒转染到NIH3T3细胞内,并用PKC信号通路阻断剂CalphostinC处理,检测受照后其荧光素酶的表达变化。结果 0.075GyX射线照射可诱导NF-κB、p50/p65和p50/p50活性增强,而前者活性增强更明显。这种转录激活能力的增强,涉及到辐射诱导的p65核转位和IκBα水平的变化,表现为受照后p65亚基核阳性率明显升高,而IκBα水平的变化正相反,在照后4h分别达到峰值和低谷。而且PCK信号通路阻断剂CalphostinC可降低0.075Gy照射对NF-κB的活化效应。结论 低水平照射诱导NF-κB的迅速活化,而且可能通过PKC通路,进而调节细胞因子等特异基因的表达,促使免疫功能增强,这可能是低剂量辐射兴奋效应的机理之一。]]> 4true [15]。免疫系统是机体防御系统的重要组成部分,特别是免疫监视作用在肿瘤发生、发展和转归上起着十分重要的作用。因此LDR免疫增强效应及其诱导的适应性反应对机体抗肿瘤能力影响的研究具有重要的理论和临床意义。本研究较系统地探讨了LDR对高剂量辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤(TL)的影响及其免疫学机理,其结果对评价LDR对机体健康影响及在临床上的应用具有重要的意义。]]> 3true [1],降低胸腺细胞凋亡^[2],具有与高剂量辐射迥然不同的细胞和分子机理^[3]。低剂量辐射可诱导适应性反应,已得到确认^[4]。在此基础上,我们进一步观察了低剂量辐射诱导小鼠胸腺细胞凋亡适应性反应的剂量、剂量率和时间效应,以阐明低剂量辐射诱导适应性反应的规律,为深入探讨其机理提供有意义的实验依据。]]> 2true [1]。然而,不同剂量对细胞周期进程的影响是否符合上述规律尚有待证实。笔者将报道不同剂量X射线全身照射后小鼠胸腺细胞、脾细胞及骨髓细胞的细胞周期效应。一、材料和方法1动物:本校实验动物部饲养繁殖的昆明系小白鼠,雄性,体重(20±2)g,随机分组,每组15只,每3只小鼠的胸腺、脾或骨髓细胞混合为1个样本以减少个体差异。]]> 1true