6true 目的 研究HP1α对辐射损伤修复的影响。方法 用反义技术单独抑制HP1α和联合抑制HR24L表达,观察细胞对辐射敏感性的影响,用免疫共沉淀法观察HP1α是否参与修复蛋白复合物的形成。结果 单独抑制HP1α,细胞对辐射敏感性与正常细胞相比差异无显著性,联合抑制HP1α和HR24L时,细胞对辐射的敏感性比单独抑制HR24L时显著增加;20Gyγ射线照射后8h,可检测出HR24L与HP1α复合物的存在。结论 HP1α与修复蛋白相互作用,参与DNA损伤修复,从而影响细胞对辐射的敏感性。]]> 5true 目的 探讨辐射损伤后HR24L修复蛋白复合物的形成,为HR24L参与切除修复和重组修复提供生化证据。方法 利用质粒共转染和免疫共沉淀技术检测HR24L复合物中关键修复蛋白的存在及其在辐射损伤后的变化。结果 20Jm²紫外线照射损伤后2h,可检测到HR24L,复合物中存在有XPA。20Gyγ射线照射后2h,检测到Ku70参与HR24L复合物的形成,照射后8h可见Rad52存在。结论 辐射损伤后,切除修复蛋白和重组修复蛋白参与HR24L复合物形成的生化证据,进一步支持HR24L参与多种修复途径的论点。]]> 4true 目的 通过检测结果的比较和原理分析,提示4种凋亡检测方法鉴别凋亡和坏死的能力及优缺点。方法 采用PI染色流式细胞测量(P-F)法、TUNEL标记流式细胞测量(T-F)法、AnnexinVFITC/PI活染流式细胞测量(A-F)法和Hoechst/PI活染荧光显微镜观察(H-O)法对γ射线诱发的人乳腺癌MCF7细胞凋亡和坏死进行检测,以羟基喜树碱和叠氮钠分别为诱发凋亡和坏死的阳性对照物。结果 4种方法对γ射线、羟基喜树碱诱发的细胞凋亡显示良好的时间剂量依赖性响应。P-F法所得凋亡率较低,曲线斜率最小;TF法反之;A-F法和HO法可获得凋亡和坏死两套数据,且两种方法的数值相近。A-F法和H-O法可识别叠氮钠所致的细胞坏死;而P-F法和T-F法不能反映其致坏死为主的真实情况。结论 P-F法和TF法不能区别凋亡和坏死,A-F法和HO法可以区别。PF法较TF法灵敏度低但简便经济。AF法快速可靠,H-O法经济实用并可同时观察细胞形态学变化。]]> 3true 2true 1true