方法 采用自旋捕捉的方法检测自由基的变化,TBA法检测脂质过氧化产物丙二醛(MDA),DTNB法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)的活性,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞内Ca²⁺浓度。结果 电磁脉冲作用大鼠大脑皮层细胞和海马细胞后,脂氧自由基水平升高。MDA水平升高,大脑皮层细胞对照组MDA水平为(6.18±0.29)nmol/mg,EMP作用组为(8.43±0.01)nmol/mg(P<0.01);海马细胞对照组MDA水平为(4.38±0.15)nmol/mg,EMP作用组为(4.98±0.39)nmol/mg(P<0.05)。GSH-px活性降低,大脑皮层细胞对照组A值为0.026±0.001,EMP作用组为0.022±0.002(P<0.05),海马细胞对照组A值为0.021±0.002,EMP作用组为0.018±0.001(P<0.05)。电磁脉冲不能直接杀死细胞,其存活率约为95%,当脉冲数达到10次时,细胞内Ca²⁺浓度开始升高。结论 电磁脉冲提高了神经细胞脂氧自由基水平,脂质过氧化产物MDA水平升高,GSH-px活性降低,预示氧化损伤效应的发生。另外,电磁脉冲不能直接杀死细胞,但可导致细胞内Ca²⁺浓度升高,增多的Ca²⁺可能成为诱发细胞凋亡的重要因素之一。]]> 41true 40true 39true 目的 研究低强度2450MHz微波(5.0mW/cm²)与4硝基喹啉氧化物(4-NQO)对人淋巴细胞DNA损伤效应的联合作用。方法 采用彗星试验来检测人外周血淋巴细胞经微波与4-NQO联合作用后的DNA损伤情况。微波与4-NQO联合暴露方式有3种:微波辐射后4-NQO染毒、微波与4-NQO同时暴露、4-NQO染毒后微波辐射。结果 微波辐射组的DNA损伤指标(彗星形状和彗星全长)与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。微波照射后4-NQO染毒组中,50,25μmolL剂量的DNA损伤指标与相应4-NQO组比较差异均有显著性(P<0.05或P<0.01)。微波与4-NQO同时暴露组或4-NQO染毒后微波照射组与相应4-NQO组比较差异无显著性(P>0.05)。结论 低强度2450MHz微波不能诱发DNA损伤,当微波辐射先于4-NQO暴露时,微波能增强4-NQO诱发的DNA损伤效应。]]> 38true 37true 36true 目的 计算高功率脉冲微波照射条件下大鼠体内的比吸收率(Specific Absorption Rate,SAR)分布。方法 在建立的脉冲辐射场及大鼠电磁模型的基础上,采用时域有限差分法计算大鼠体内的感生电场分布,进而得到比吸收率。结果 计算了不同脉宽和重复频率条件下的峰值比吸收率和平均比吸收率,并按防护标准的要求分别计算了SAR1、SAR10和WBASAR。结论 照射条件相同,仅改变微波脉冲宽度,峰值比吸收率变化很小;在同一次照射中,比吸收率按SAR1Max、SAR10Max和全身平均SAR值依次下降,存在局部“热点”;在相同的远场照射条件下,实验动物越小,全身平均SAR值越大。]]> 35true 目的 探讨神经酰胺和JNK信号通路在UVA诱导的细胞凋亡中的作用。方法 分别用MTT法和DNA梯形条带检测细胞死亡率和细胞凋亡;Western blot分析JNK信号通路的激活情况。结果 UVA照射后,正常的淋巴细胞JY出现明显的细胞凋亡,而MS1418细胞则没有。MS1418来自D型Niemann-Pick病人,酸性鞘磷脂水解酶遗传性缺陷,导致神经酰胺产生受阻。给予外源性神经酰胺,两种细胞都出现明显的细胞凋亡,表明UVA诱导的细胞凋亡是通过神经酰胺介导的。UVA激活了JY而不是MS1418细胞的JNK信号通路;给予外源性神经酰胺,两种细胞的JNK信号通路都被激活,说明神经酰胺位于JNK信号通路的上游。结论 UVA诱导的细胞凋亡依赖神经酰胺和JNK信号通路。]]> 34true 33true 目的 动态观察高场强电磁脉冲辐射(EMP)对小鼠肝细胞核DNA含量及倍体的影响,探讨电磁辐射的生物学效应。方法 应用高场强EMP发射源对二级昆明小鼠进行全身辐射,场强分别选用8×10³、2×10⁴和6×10⁴Vm,发射源相关技术参数:脉冲上升时间20ns,脉宽30μs,2min内发射5个单脉冲;采用Feulgen染色动态观察小鼠肝细胞核内DNA含量的变化,观察时间1年,共设10个时相点(n=6),并用德国IBSA显微数字图像分析系统作DNA含量定量分析和倍体分型。结果 小鼠经高场强EMP辐射后3个月内,肝细胞核DNA含量与正常对照组差异无显著性,以二倍体细胞(2C)为主,四、六倍体(4C,6C)较少,八倍体(8C)偶见;辐射后6个月,8×10³Vm辐射组比对照组DNA含量高(P<0.05),2C数量减少,4C和6C增加;至辐射后9个月和12个月,各辐射组肝细胞核DNA含量比其他各时相点辐射组及同一时相点对照组显著增高(P<0.01),并且以4C为主,6C和8C增加,而2C明显减少。结论 高场强EMP对小鼠肝DNA含量及倍体有影响,且表现为远后效应,推测电磁辐射对肝的生物学效应中肝细胞核酸可能是一个重要的靶点,这将为进一步研究其损伤效应及其作用机制提供实验性依据。此外，本研究结果提示要注重电磁辐射远后效应的研究，以确保研究结果的完整性与可靠性，为其损伤防治提供新思路。]]> 32true 目的 研究自然高温环境下, 受γ射线照射小鼠生存的变化及外周血淋巴细胞的改变。方法 实验动物分为室温组和不同时间的自然高温环境组, 分别接受6.5,9.0Gy的γ射线照射和相应的高温作用后, 观察30 d内小鼠的死亡情况以及外周血淋巴细胞变化的规律。结果 65Gy照射的小鼠, 高温9 h和全自然环境组的生存时间与室温组差异有显着性, 9,0Gy照射的小鼠, 高温6,9 h、全自然环境组的生存时间和室温组差异有显着性;室温组小鼠外周血淋巴细胞的下降速度低于各高温组且外周血淋巴细胞存在顿挫回升, 而各高温组无。结论 高温环境, 受照射小鼠的生存指标明显下降;加重照射后早期外周血淋巴细胞下降。]]> 31true 目的 根据基因编码序列推测其氨基酸序列,预测LRP16基因编码蛋白的功能并通过实验加以证实。方法 利用GeneBank数据库获取LRP16基因序列,然后推测出该基因编码蛋白质的一级结构,对该序列蛋白结构域的同源性进行搜索;将LRP16基因ORF插入pcDNA3.1,构建LRP16基因的真核表达质粒,采用Superfect稳定转染急性粒细胞白血病细胞系HL60,筛选稳定表达LRP16基因的细胞;以紫外灯照射筛选后有HL60稳定过表达的HL60细胞和对照细胞;采用单细胞凝胶电泳技术检测有LRP16过表达对HL60细胞增殖及DNA损伤后修复的影响。结果 在LRP16基因理论蛋白序列的第148至315氨基酸残基之间具有与人类组蛋白H2A1C末端相类似的同源序列hismacro、COG2110和A1pp,同源性高达80%以上。LRP16基因的过表达具有抗紫外线引起HL60细胞DNA损伤和增强损伤后的修复作用。结论 LRP16基因编码蛋白可能具有抗紫外线的DNA损伤作用。]]> 30true 目的 探讨高功率微波(highpowermicrowave,HPM)辐照后下丘脑与垂体中糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)的变化及其意义。方法 采用2～90mWcm²的HPM辐照130只二级雄性Wistar大鼠,分别于照后6h、1、3、7、14d、28d与3月活杀动物,取下丘脑与垂体,采用免疫组化和图像分析技术研究GR在辐照后大鼠下丘脑与垂体中的表达。结果 辐照后下丘脑神经元中GR表达减弱。10mWcm²组在6h与1d时较对照组有显著下降(P<0.05),7d后呈恢复趋势;50mWcm²组在1d时有显著下降(P<0.05)。辐照后垂体远侧部内分泌细胞GR表达增强。10mWcm²组在6h时有显著升高(P<0.01),7d后呈恢复趋势;50mWcm²组在1、3d时均有显著升高(P<0.01)。结论 一定功率密度的HPM辐照后,下丘脑GR表达下降;垂体GR表达增强;HPA轴负反馈调控紊乱;表明GR参与了HPM辐照后下丘脑垂体肾上腺轴病变的病理生理过程。]]> 29true 目的 探讨LRP15基因在K562细胞中对紫外线诱导的DNA损伤的修复作用,以进一步研究该基因的功能。方法 利用真核表达质粒pcDNA3.1构建LRP15基因开放阅读框架(ORF)序列的正义及反义重组质粒;两种质粒经阳性脂质体介导法分别转染K562细胞,G418筛选阳性克隆;采用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术观察两组细胞对紫外线诱导的DNA损伤的修复作用的差异。结果 PCR鉴定证实,正义及反义重组质粒中LRP15基因ORF序列均按预定方向正确插入;SCGE实验表明,经紫外线照射后两组细胞的DNA基础损伤无明显差异(P=0.156)。但经45及90min修复后实验组细胞的DNA迁移长度明显小于对照细胞(P<0.001)。结论 成功构建LRP15基因的正义及反义真核表达质粒;LRP15基因对紫外线诱导的DNA损伤具有修复作用,可能是一个DNA修复基因。]]> 28true 目的 探讨脉冲电磁场(PEMF)对大鼠垂体前叶内分泌细胞超微结构的影响。方法 SD雄性大鼠30只,随机分为5组,每组6只。其中1组为对照组,其余4组为辐照组。以场强200kVm的PEMF对辐照组大鼠进行200次脉冲的全身辐照。于照后6、12、24和48h活杀动物,取出垂体,制作常规电镜标本,观察垂体前叶内分泌细胞超微结构的改变。结果 辐照后6h大鼠垂体前叶内分泌细胞超微结构即表现为变化,其中催乳素细胞及生长激素细胞变化明显,表现为线粒体肿胀、嵴断裂、包涵体形成,高尔基复合体扩张及散在的各级溶酶体;至照后48h变化呈逐渐加重趋势,包括线粒体空泡化及其内部髓鞘样结构形成,内质网高度扩张,大量的次级溶酶体出现,细胞核内异染色质边集等。结论 PEMF辐照可对大鼠垂体前叶内分泌细胞结构造成损伤,其主要受损细胞器为线粒体和内质网。]]> 27true 目的 观察HPM辐照后SD大鼠肺脏形态学的变化情况。方法 辐照后不同时间点活杀SD大鼠取肺脏,分别用3%戊二醛以及10%福尔马林固定,用常规光镜以及扫描电镜观察大鼠肺脏形态学的变化。结果 HPM辐照SD大鼠后6h,肺泡上皮细胞出现明显变性,可见肺泡上皮细胞脱落。肺泡隔断裂,形成肺大泡。辐照后24h,肺上皮细胞变性严重,肺泡隔断裂,变薄,出现广泛的肺大泡。间质水肿,炎细胞浸润。辐照后48h,肺内小静脉淤血。辐照后7d,肺泡隔局灶性恢复。结论 HPM辐照可造成肺组织明显损伤,损伤具有时相性和可逆性。]]> 26true 目的 探讨高功率微波(high power microwave,HPM)辐照后对大鼠肝组织形态结构的影响。方法 雄性SD大鼠36只,随机分为两组,实验组(24只)和正常对照组(12只),在微波辐照后6、24和48h及7d活杀大鼠,取肝脏组织;30mgL戊二醛固定,进行常规扫描电镜标本制备;甲醛固定制备光镜标本。结果 对照组肝细胞形态正常,肝板排列整齐。辐照后6h,肝细胞轻度肿胀。辐照后24h,肝细胞肿胀,肝板排列紊乱,肝窦狭窄。辐照后48h,肝细胞变性更明显,肝板排列严重紊乱,肝细胞空泡化明显,肝窦内广泛淤血。辐照后7d,肝细胞仍然肿胀,空泡化现象主要在中央静脉周围,肝窦内淤血有所减轻。结论 高功率微波辐照对肝组织的损伤主要是发生肝细胞肿胀和肝窦淤血;这可能与辐照的致热效应,以及电场、电离作用等有关。]]> 25true 目的 研究S波段高功率微波(HPM)辐射后乳鼠心肌细胞的损伤效应及其机制。方法 采用平均功率密度为5～30mW/cm²的S波段HPM模拟源辐射原代培养的乳鼠心肌细胞,应用流式细胞术、原子力显微镜观察辐射后心肌细胞凋亡和坏死率、[Ca²⁺]i及细胞膜形态。结果 10～30mW/cm²的S波段HPM辐射后6h,心肌细胞凋亡和坏死率增加(P<0.05或P<0.01),且随辐射剂量增大,坏死细胞增多;30mW/cm²HPM辐射后即刻[Ca²⁺]i升高(P<0.01),细胞膜发生穿孔。结论 10～30mW/cm²的S波段HPM辐射可造成心肌细胞凋亡和坏死,[Ca²⁺]i升高以及细胞膜穿孔,是S波段HPM辐射致心肌细胞损伤的重要机制。]]> 24true 目的 研究莪术油对中波紫外线所致皮肤损伤的防护作用及其机制。方法 建立UVB氧化损伤模型(照射30d,累计28.38J/cm²)。观察皮肤外观及HE染色后表皮厚度和真皮成纤维细胞数量的变化。酶法检测皮肤匀浆上清液中抗氧化酶(过氧化氢酶CAT、谷胱甘肽GSH-Px和超氧化物歧化酶SOD)活性和丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)。结果 ①光镜下,UVB照射组和基质空白组照射侧可见表皮增厚,真皮中成纤维细胞减少,而对照侧未见此病理变化;莪术油防护组照射侧表皮未见增厚,成纤维细胞数增多,但对照侧成纤维细胞数增多不明显。②UVB照射组和基质空白组照射侧皮肤中MDA含量明显升高,CAT、GSH-Px和SOD活性及T-AOC降低,而对照侧未见明显差异;莪术油防护组照射侧CAT、GSH-Px、SOD活性及T-AOC增强,MDA含量降低,而对照侧未见明显改变。结论 莪术油具有对UVB皮肤氧化损伤的防护作用,其作用机制可能与提高抗氧化酶含量及清除体内自由基有关。]]> 23true 目的 探讨meso-四(4-羟基苯基)卟啉^{[5,10,15,20-tetrakis(4-hydroxyphenyl)porphyrin]}对电磁脉冲(EMP)照射离体人脐静脉内皮细胞的防护作用。方法 ①用MTT法进行meso-四卟啉对人脐静脉内皮细胞的毒性试验,找出最佳用药浓度,然后依此浓度作为防护药物浓度;②用化学发光法检测卟啉对人脐静脉内皮细胞在不同场强EMP照射下的防护效果。实验结果采用方差分析和独立样本t检验分析。结果 ①meso-四(4-羟基苯基)卟啉对人脐静脉内皮细胞的最佳用药浓度为0.01μg/ml;②经过EMP照射后,用药组化学发光强度(第1峰值和5s面积)明显低于对照组。结论 0.01μg/ml的meso-四(4-羟基苯基)卟啉对EMP具有一定的辐射防护作用。]]> 22true 目的 探讨高功率微波(HPM)辐射后心脏β₁肾上腺素能受体(β₁-AR)表达的变化及其意义。方法 采用平均功率密度为50mW/cm²的S波段HPM模拟源辐射45只二级Wistar雄性大鼠,应用光镜、免疫组织化学、RT-PCR和图像分析技术,定量研究HPM辐照后大鼠心脏组织结构改变及β₁-AR蛋白及mRNA变化规律。结果 50mW/cm²HPM辐射后大鼠心肌纤维排列紊乱,颗粒变性甚至肌浆凝聚,7d内进行性加重,14d后减轻;辐射后1d,β₁-AR蛋白于心内膜下及肌层心肌细胞膜及胞浆表达增强,3d达高峰(P<0.05),7d仍有较强的表达(P<0.05),14d恢复至正常水平;β₁-ARmRNA于6h～28d均见升高(P<0.01),除7d外,随时间延长,增强更加明显。结论 50mW/cm²的HPM辐射可造成心脏组织结构的损伤,心肌β₁-AR表达增强,参与了HPM辐射致心脏损伤的病理生理过程。]]> 21true 目的 探讨高功率微波(HPM)辐照大鼠睾丸对血睾屏障的影响。方法 雄性SD大鼠35只,随机分为7组,每组5只。6组为辐照组,1组为对照组。于辐照后2、6、12、48、96h和8d活杀大鼠后取双侧睾丸组织各约1mm³,镧醛固定液固定后制备电镜标本,在透射电镜下进行观察。结果 对照组可见硝酸镧主要沉积在曲细精管基膜部和精原细胞周围,未越过紧密连接;辐照后2～6h电镜下所见与对照组大致相同;辐照后12～96h,从基底部到管腔面的各层生精细胞之间、支持细胞内都有大量的镧颗粒沉积;辐照后8d,仍可见细胞间隙增大,部分区域靠近精子表面的镧颗粒沉积甚至比前面时间点的更为严重。结论 高功率微波辐照能够改变细胞的通透性,破坏血睾屏障的保护作用。]]> 20true 目的 建立电磁波照射时大鼠的电磁模型,并计算大鼠体内的比吸收率(specificabsorptionrate,SAR)分布。方法 在用计算机辅助设计(CAD)软件建立大鼠三维模型而获得的电磁模型的基础上,采用时域有限差分法计算某一电磁波照射条件下大鼠体内SAR。结果 利用建立的大鼠电磁模型计算了电磁波照射时体内的平均SAR和SAR分布。结论 所建立的大鼠电磁模型可以用于电磁波照射时SAR的计算,为相关的电磁生物效应研究提供一个参数。]]> 19true 目的 观察微波辐射对家兔小脑运动性学习记忆功能的损伤效应,检测微波辐射对谷氨酸受体2(GluR2)磷酸化的影响。方法 选择建立牢固瞬膜条件反射的家兔,随机分为对照组和微波辐射组(辐射后0、3、24和72 h等4个时相点),辐射组给予平均功率密度90 mW/cm²的微波辐射30 min,测定辐射后家兔的即刻肛温并计算比吸收率(SAR)值;检测辐射后即刻家兔瞬膜条件反射的变化;蛋白质免疫印迹法检测家兔小脑GluR2及其磷酸化蛋白质的表达变化。结果 90 mW/cm²微波辐射后即刻家兔肛温显著升高3.02℃,SAR值为8.74 W/kg;瞬膜条件反射在辐射后0 h显著降低,3 h后基本恢复至正常水平;小脑GluR2的蛋白表达水平无显著变化但GluR2的磷酸化水平在微波辐射后即刻显著降低。结论 90 mW/cm²的微波辐射30 min能使家兔产生明显热效应,并影响小脑GluR2的磷酸化,最终导致小脑运动性学习记忆功能障碍。]]> 18true 目的 探讨微波辐射对大鼠海马线粒体形态及能量代谢的影响。方法 采用30 mW/cm²微波辐射30只雄性Wistar大鼠,于辐射后6 h、1 d、3 d和7 d活杀取海马,采用电镜观察线粒体超微结构改变,酶活性染色显示线粒体ATP酶活性改变,分光光度计测定线粒体琥珀酸脱氢酶(succino denhydrogenase,SDH)、单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活性,高效液相色谱测量线粒体腺苷酸含量的变化。结果 30 mW/cm²微波辐射后6 h,海马线粒体大小、形状不规则,辐射后1和3 d线粒体损伤加重,出现肿胀、空化、嵴紊乱、短小、数量减少等改变。SDH活性和ATP含量在辐射后6 h降低,3 d降至最低(P<0.01),7 d呈恢复趋势。ATP酶和MAO活性变化一致,于辐射后1和3 d活性升高最为显著(P<0.01)。结论 微波辐射可损伤大鼠海马线粒体结构与功能,使线粒体能量代谢酶异常。]]> 17true 16true 目的 研究平均功率密度5 mW/cm²的高功率微波(HPM)对神经细胞活性的影响,为制定微波照射的安全标准提供参考数据。方法 出生后12 h内Wistar大鼠乳鼠皮层神经细胞常规培养7 d后,进行HPM照射。采用细胞内ATP酶活性测定法,检测HPM对原代培养神经细胞总ATP酶、钙镁ATP酶和钠钾ATP酶活性的影响,并用MTT法检测照射后细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的变化,观察时间点分别为HPM照射后1和6 h,1、3和7 d。结果 原代培养神经细胞经平均功率密度5 mW/cm²的HPM连续照射6 min后,同一时间点内HPM照射组和对照组之间细胞SDH活性和各ATP酶活性均无显著差异。结论 平均功率密度为5 mW/cm²的HPM照射对原代神经细胞的活性无显著影响,提示就神经细胞活性而言,该功率密度的HPM照射是安全的。]]> 15true 目的 探讨微波辐射对大鼠大脑皮层和海马突触素Ⅰ及其相关影响因子BDNF和受体TrkB表达的影响。方法 采用30mW/cm² 微波辐射Wistar雄性大鼠40只,于辐射后6h、1d、3d和7d取材,通过免疫组织化学和RT-PCR检测大脑皮层和海马突触素Ⅰ,BDNF和TrkB表达的改变。结果 30 mW/cm²辐射后,突触素ⅠmRNA在大脑皮层于辐射后6h和1d增加(P<0.01),而3d和7d减少(P<0.01);海马突触素ⅠmRNA于辐射后6h和1d增加(P<0.01)。BDNF蛋白在大脑皮层于辐射后6h表达增强(P<0.05),1～3d达高峰(P<0.01);在海马于辐射后1d表达增强(P<0.05),3d～7d达高峰(P<0.01)。大脑皮层BDNF mRNA辐射后6h增加(P<0.01),1d减少(P<0.01),3d和7d又见增加(P<0.01或P<0.05);海马BDNF mRNA于辐射后1d增加(P<0.01)。TrkB蛋白在大脑皮层于辐射后1～3d表达增强(P<0.01);在海马于辐射后3～7d表达增强(P<0.01)。TrkB mRNA在大脑皮层于辐射后6h 和7d增加(P<0.01);海马TrkB mRNA于辐射后6h、3d和7d减少(P<0.01或P<0.05)。结论 微波辐射可引起大脑皮层和海马突触素Ⅰ、BDNF及其受体TrkB表达异常,参与了微波辐射所致的突触传递障碍及其修复过程。]]> 14true 目的 研究旋转磁场对小鼠骨髓型急性放射病的治疗效果。方法 132只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组(N),单纯磁疗组(M),单纯照射组(R)和照射磁疗组(R+M)4组,N组小鼠不作其他处理,R组和R+M组小鼠接受6.0 Gy剂量的 ⁶⁰Co γ 射线照射,M组及R+M组予以磁场处理30d,每天2次,每次1.5h。观察小鼠30d的存活率和存活期;分别于0、5、9、15、21、30d检测外周血细胞数;测定第9、23、30d骨髓单核细胞数(BMNC)、脾集落形成单位(CFU-S)、脾脏指数(脾体比)、骨髓细胞周期、细胞凋亡,观察股骨骨髓病理切片及检测骨形态发生蛋白(BMP2/4)的表达水平。结果 1N组和M组小鼠无死亡。R+M组与R组比较,磁疗提高了小鼠的存活率和存活期(P<0.01)。2R+M组与R组比较,磁疗提高了R+M组第15天外周血白细胞数及血红蛋白含量、第21天红细胞数、第30天血小板数(P<0.05)。3第9天R+M组CFU-S、BMNC数、细胞G₂+M期比例高于R组,而总凋亡率低于R组(P<0.05)。第23天脾脏指数R+M组高于R组(P<0.05)。4骨髓病理检查显示,磁场可促进照射后骨髓造血组织结构的修复,R组骨髓早期较空虚,而R+M组骨髓细胞较充盈,随着时间的推移,两者均逐渐恢复正常;R+M组的骨髓BMP2/4表达水平亦明显高于R组。结论 旋转磁场对放射损伤小鼠骨髓造血具有明显的保护作用,能减少骨髓细胞的凋亡,其机制可能是促进放射损伤后造血细胞和造血微环境的修复。]]> 13true 目的 观察高功率微波(HPM)辐射后大鼠海马组织中突触后致密物(PSD)-95及cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的变化。方法 采用10、30和100 mW/cm² HPM照射75只Wistar雄性大鼠,于辐射后6 h、1、7、14和28 d活杀取海马组织,采用免疫组化、凝胶阻滞实验和图像分析等技术,观察海马神经元中PSD-95及CREB的变化。结果 HPM辐射后大鼠海马神经元胞浆中PSD-95的表达有不同程度的增加;10 mW/cm²组辐射后6 h, PSD-95表达增加,于辐射后1 d达高峰,28 d基本恢复正常;100 mW/cm²组辐射后6 h, PSD-95表达增加,MOD于1 d达高峰,IOD于7 d达高峰,28 d基本恢复至正常水平;30 mW/cm²组于辐射后3 d内,海马组织CREB与DNA的结合能力进行性降低。结论 HPM辐射后大鼠海马PSD-95表达增加,CREB与DNA结合能力减弱,参与了HPM辐射后海马组织损伤及海马神经元突触可塑性改变的病理生理过程。]]> 12true 目的探讨1, 6-二磷酸果糖(FDP)对微波辐射后大鼠海马线粒体呼吸链相关基因细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)表达的影响。方法Wistar雄性大鼠随机分为假辐射组(5只),辐射组(10只)和辐射+药物组(10只)。采用30mW/cm²微波辐射,辐射+药物组于辐射前3d 腹腔注射350mg/kg FDP,连续给药3或10d,1次/d。于辐射后6h和7d活杀取海马,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和图像分析检测大鼠海马组织COX亚基Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ mRNA表达,通过Western blot和图像分析检测大鼠海马组织COX Ⅰ蛋白表达变化。结果辐射后6h和7d大鼠海马COX Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ mRNA表达均较假辐射组降低,药物组大鼠海马COX Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ mRNA与相应辐射组相比均见表达增加,以给药后3d(辐射后6h)组增加最为显著(t_{COX Ⅰ}=3.2205,t_{COX Ⅱ}=3.5762,t_{COX Ⅳ}=3.0408,P<0.05)。辐射后6h和7d大鼠海马COX Ⅰ蛋白表达均较假辐射组减少,给药后3d(辐射后6h)与辐射后6h相比COX Ⅰ蛋白表达升高(t=2.9614,P<0.05),给药后10d(辐射后7d)与辐射后7d相比改变不显著。结论FDP对微波辐射后大鼠海马线粒体呼吸链相关基因COX表达降低有一定的促恢复作用。]]> 11true 10true 方法 首先基于鼠核磁共振三维解剖图像,建立了包含45种生物组织的鼠电磁模型,再通过改变模型的单元尺寸来改变模型的大小与体重,得到长度9～24cm,相应体重16～334g共16个鼠电磁模型;然后采用时域有限差分法计算3GHz微波照射下各个鼠模型体内的感生电场分布,进而得到鼠模型吸收的电磁能量与比吸收率。结果 在3 GHz微波照射下,鼠体重与全身平均比吸收率的关系可分为3个区域,每个区域均可拟合成一条直线;其中,小鼠区域全身平均比吸收率变化剧烈,中等鼠区域变化趋于平缓,大鼠区域变化更为平缓。鼠体重与电磁能量吸收的关系可以拟合成一条二次曲线,当鼠模型较小时,吸收的电磁能量大致相同,当鼠模型逐渐增大时,鼠吸收的电磁功率也逐渐增大,但增大的幅度小于体重增加的幅度。结论 动物越大,其在电磁场中吸收的电磁功率也越大,但其全身平均比吸收率却越小。在相同的照射条件下,大鼠因体重变化而产生的受照剂量差异比小鼠小很多,因此建议使用大鼠作为电磁生物效应实验用鼠。]]> 9true 目的 研究复制叉前进受阻后Artemis蛋白S516和S645丝氨酸位点的磷酸化和对细胞周期复制检测点的影响。方法 Western-blotting检测细胞受紫外线C照射后Artemis S516和S645两个位点的磷酸化变化;突变Artemis蛋白的第516和645位氨基酸,构建非磷酸化和模拟磷酸化的突变体S516-645A和S516-645D表达质粒,转染HEK 293细胞建立稳定表达细胞系;流式细胞仪检测受UVC照射后的细胞周期,Western-blotting检测UVC照射后2、6、12 h的Chk1、γ-H2AX、Cdk2蛋白的表达变化,免疫共沉淀激酶实验检测Cdk2 IP激酶的活性。结果 Artemis蛋白S516和S645位点在UVC照射后发生迅速和持久的磷酸化,ATR是Artemis S516和S645磷酸化的主要激酶;S516-645A非磷酸化双突变导致细胞周期在S期复制检测点停留时间延长。Artemis S516-645A双突变不影响Chk1、Cdk2、γ-H2AX蛋白表达水平,却抑制了Cdk2 IP激酶的活性。结论 ATR激酶对Artemis蛋白S516和S645位点的磷酸化促进了细胞周期从UVC引发的复制检测点中恢复。]]> 8true 目的 探讨安多霖对微波辐射的防护作用及作用机制。方法 选用SPF级雄性SD大鼠,随机分为3个给药组,剂量分别为3、6、9 g/kg,另设辐射模型组和健康对照组,每组20~21只。给药组大鼠连续灌胃安多霖20 d ,停药后,给药组和辐射模型组动物行一次平均功率密度为100 mW/cm²高功率微波全身辐照10min,健康对照组不辐照。动物分别于辐照后24、48 h和5 d 取睾丸组织,制作睾丸石蜡切片,采用原位末端标记术(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡,免疫组化法检测细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2。结果 微波辐射后24、48 h和5 d,与健康对照组相比,辐射组睾丸生精细胞的凋亡数明显升高(t=-41.89、-11.29、-62.24,P<0.05),Bcl-2/Bax比值明显降低(t=8.49、4.36、4.47,P<0.05);而与辐射组相比,低、中和高剂量给药组的凋亡细胞数显著降低(F=5.25、9.79、15.35, P<0.05), Bcl-2/Bax比值明显升高(F=20.17、11.75、11.98, P<0.05)。结论 高功率微波辐射可诱导大鼠生精细胞凋亡增加,安多霖对细胞凋亡有明显抑制作用。安多霖抑制大鼠睾丸生精细胞凋亡的机制可能与其能够上调Bcl-2及下调Bax蛋白的表达,改变了Bcl-2/Bax的比值有关。]]> 7true 6true 目的 研究let-7和miR-24在紫外线B(UVB)诱导的细胞凋亡中的可能作用。方法 NIH3T3细胞受50 J/m²UVB照射后,用Hoechest 33342/PI染色观察其凋亡情况;RT-PCR检测let-7和miR-24的表达水平。利用在线数据库PicTar等预测它们的靶基因,并用GOstat软件对这些靶基因进行功能分类。结果 荧光显微镜下,NIH3T3细胞经UVB照射后可见典型的凋亡和坏死细胞;let-7和miR-24在UVB照射组的表达水平较对照组明显增加。用GOstat进行功能分类后发现,casp3、bcl2l2、map3k1和cdk5等基因同时也是UVB诱导的细胞周期调节的靶基因。结论 let-7和miR-24可能参与UVB诱导的细胞凋亡。]]> 5true 目的 探讨3种不同波段电磁辐射[X波段、S波段、电磁脉冲(EMP)]对大鼠心脏损伤的病理学改变及损伤程度差异。方法 采用二级Wistar大鼠180只,应用电脑随机法分为对照组(36只)、EMP辐照组(48只)、S波段微波辐照组(48只)、X波段微波辐照组(48只)。分别于照后6 h、1、3、7、14、28 d、6和12个月活杀,切取大鼠心脏组织标本行组织学及组织化学观察。结果 与对照组比较3种波段辐照组大鼠心脏呈现不同程度损伤,变化规律相似,以6 h~7 d心脏损伤呈加重趋势,心肌纤维排列紊乱,糖原颗粒减少,核染色质浓缩,蒲肯野纤维溶解,间质水肿,心肌间有浆液渗出。14~28d后心脏呈修复恢复期。6~12个月心脏组织与对照组基本相似。比较同一时间点3种波段辐照组X波段辐照心脏损伤最重、S波段次之、EMP组最轻。正常对照组心脏组织结构基本正常。结论 3种不同波段的电磁辐射均会造成不同程度的心脏损伤,X波段>S波段>EMP,提示波长越短、频率越高致心脏损伤越重,且恢复时间越长。]]> 4true 目的 探讨胃镜冷光源照射对美蓝(MB)染色后的胃癌细胞DNA的损伤情况,并探索损伤的发生机制和作用规律。方法 应用单细胞凝胶电泳技术,检测DNA损伤情况;Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞仪检测细胞凋亡;采用荧光探针 DCFH-DA,进行细胞内活性氧(ROS)检测。结果 冷光照射MB染色的SGC7901细胞后,其DNA损伤程度较未照射组增加( F =8.39, P<0.05),损伤严重程度与光照时间呈正相关,光照停止则有损伤修复,照射后细胞较未照射细胞出现明显凋亡(χ²=7.71, P<0.05);同时,经照射后的细胞内ROS高于未照射组( F=34.11, P<0.01)。结论 美蓝色素内镜的冷光辐射可造成SGC7901细胞的DNA损伤,并诱发细胞凋亡,其作用机制与光化学反应激发产生的过量ROS有关。]]> 2012/2/17 15:32:59 3true 目的 探讨高功率毫米波持续急性照射导致小鼠死亡情况下肺组织的变化情况,旨在为揭示毫米波损伤机制提供参考资料。方法 将小鼠缚于木质平板,置于工作频率为34.1 GHz、平均输出功率分别为5、10和12 W,照射距离分别为10和20 mm的高功率毫米波照射源正下方,持续照射至小鼠死亡。取肺, 0.9%的生理盐水快速漂洗后,放入10%的甲醛溶液中固定,石蜡包埋、组织切片、HE染色、CCD照相后,采用IPP图像分析软件,利用整合平均光密度和面积比的显微图像定量分析方法分析肺部的病理变化特征。结果 在HA23.16和HA9.92型号角锥喇叭天线照射下,较高平均功率12W连续照射可导致动物最快于110 s左右死亡;而较低功率(平均5 W)连续照射,则可在30 min内导致动物死亡。受照后死亡的动物肺部均见明显出血现象;但不同毫米波照射参数条件下,肺部出血程度不同。其中,当平均功率为10和12 W时,小鼠肺部出血程度最严重,且肺部支气管和血管有明显的破裂现象,支气管可见巨噬细胞。而当平均功率为5 W时,肺部出血程度明显减轻,且支气管和血管无严重的破裂现象。结论 高功率毫米波急性照射可导致小鼠肺部出血等损伤,肺组织损伤程度与毫米波照射功率呈显著正相关。由于高功率毫米波可导致明显热效应,推测急性、快速热效应所致小鼠肺损伤可能是动物致死的重要原因。]]> 2true 目的 观察电磁辐射对CD34+造血干细胞JAK2和STAT5蛋白活化的影响,探讨JAK2和STAT5蛋白在电磁辐射致造血干细胞损伤中的作用。方法 从脐血中分离培养CD34+造血干细胞,分别用平均功率为1、5、25 mW/cm²的电磁波辐射20 min,干预组(平均辐射强度为25 mW/cm²)使用AG490(终浓度10^-6 mol/L)预处理CD34+造血干细胞30 min。检测正常组、辐射组和干预组12、24和48 h时细胞活力(MTT法)、细胞凋亡率(流式细胞术)、Caspase-3蛋白水平(WB法)、磷酸化JAK2和STAT5蛋白水平(WB法)。结果 与正常组比较,辐射组细胞12和24 h活力降低、细胞凋亡率升高,具有剂量效应,磷酸化JAK2和STAT5蛋白表达呈升高后降低的趋势。干预组12和24 h细胞活力显著高于辐射25 mW/cm²组,细胞凋亡率显著低于辐射25 mW/cm²组,磷酸化JAK2和STAT5蛋白水平较辐射25 mW/cm²组低。结论 JAK2和STAT5蛋白参与了1～25 mW/cm²功率范围内的电磁辐射对CD34+造血干细胞的损伤过程,阻断JAK2和STAT5蛋白活化可缓解CD34+造血干细胞凋亡的发生。]]> 1true